Tweewegkruising vrouwelijke dieren worden gekruist met tweewegkruising mannelijke dieren om de F2 te vormen. In dit systeem worden de volle effecten van heterosis in beide F1 kruisingen gebruikt. Vierwegkruisingen worden veel gebruikt in de commerciële kippenfokkerij. Alle drie redenen voor het kruisen van rassen vind je terug in leg- en vleeskippenfokkerij: heterosis gebruiken, de goede eigenschappen van verschillende rassen benutten en selecteren in de rassen op negatief gecorreleerde eigenschappen die niet in één ras te verenigen zijn. In deze kippenfokprogramma’s zijn veel (15 – 20) eigenschappen belangrijk: veel van deze zijn negatief gecorreleerd aan elkaar en/of hebben een lage erfelijkheidsgraad. Heterosis wordt hier ten volle benut omdat eerst de selectie op een beperkt aantal eigenschappen in verschillende lijnen wordt toegepast en daarna worden de lijnen gekruist om de beste combinatie van eigenschappen te krijgen.
A * B > F1 (AB = 50 % A, 50 % B) en C * D > F1 (CD = 50 % C, 50 % D)
F1 (AB) * F1 (CD) > F2 (ABCD = 25 % A, 25 % B, 25 % C, 25 % D)