5. Practicum - Weefselkweek vermeerdering leliebolschubben

Wat heb je nodig?:

• Buizen met groeimedium
• Binnenste schubben van onbeschadigde leliebollen
• 70 % ethanol
• 1% NaOCl-oplossing
• Gesteriliseerd demi-water
• Scalpel en pincet
• Laminair flowkast (het kan ook in een (plexi)glas aquariumbak. Deze bak wordt dan op zijn zijkant geplaatst en van binnen ontsmet met 70% ethanol)

Werkwijze:

1. Maak buizen met medium en steriliseer deze in buizen.
   
   
2. Medium:
   MS-zouten                        4,4 g/L
   sucrose                             30 g/L 
   Thiamine(vit B1)               0,4 mg/L 
   Myo-inositol                    100 mg/L
   NAA 0,1 mg/Lagar           6 g/L
   pH 6,0 
   
   
3. Ontsmetten van schubben
   Grof vuil onder kraan verwijderenschubben gedurende enkele seconden in 70% ethanolschubben voor 20 minuten in de 1% NaOCl- oplossingdaarna bleekwater verwijderen door te spoelen met gesteriliseerd demiwater gedurende 3, 10 en 15 minuten.
   
   
4. Enten, snijd uit de bolschub een 4-kant van 7 X 7 mm en plaats deze in de buis met medium net de bolle kant op het medium.
   
   
5. Kweken: zet de buizen weg bij 20-26^oC , licht is niet noodzakelijk
   
   
6. Na 2-3 weken ontstaan de eerste groeipunten